(Flowcytometrie, FCM) is in selanalysator dy't de fluorescensintensiteit mjit fan kleurde selmarkers. It is in high-tech technology ûntwikkele op basis fan de analyze en sortearring fan inkele sellen. It kin fluch mjitte en klassifisearje de grutte, ynterne struktuer, DNA, RNA, aaiwiten, antigens en oare fysike of gemyske eigenskippen fan sellen, en kin wurde basearre op de kolleksje fan dizze klassifikaasjes.
Flowcytometer bestiet benammen út de folgjende fiif dielen:
1 Flow keamer en fluidics systeem
2 Laser ljocht boarne en beam foarmjouwing systeem
3 Optysk systeem
4 Electronics, opslach, werjefte en analyse systeem
5 Cell sortearring systeem
Under harren is laser excitation yn de laser ljocht boarne en beam foarmjen systeem de wichtichste mjitting fan fluorescence sinjalen yn flow cytometry. De yntinsiteit fan it opwekkingsljocht en de eksposysjetiid binne relatearre oan de yntinsiteit fan it fluorescinsjesinjaal. Laser is in gearhingjende ljochtboarne dy't iengolflingte, hege yntinsiteit en ferljochting mei hege stabiliteit kin leverje. It is de ideale opwekkingsljochtboarne om oan dizze easken te foldwaan.
D'r binne twa silindryske linzen tusken de laserboarne en de streamkeamer. Dizze linzen fokusje in laserbeam mei in sirkelfoarmige dwerstrochsneed út 'e laserboarne yn in elliptyske beam mei in lytsere dwerstrochsneed (22 μm × 66 μm). De laser-enerzjy binnen dizze elliptyske beam wurdt ferdield neffens in normale ferdieling, en soarget foar konsekwinte ferljochtingsintensiteit foar sellen dy't troch it laserdeteksjegebiet passe. Oan 'e oare kant bestiet it optyske systeem út meardere sets fan linzen, pinholes en filters, dy't rûchwei ferdield wurde kinne yn twa groepen: streamop en streamôfwerts fan 'e streamkeamer.
It optyske systeem foar de streamkeamer bestiet út in lens en pinhole. De wichtichste funksje fan de lens en pinhole (meastentiids twa linzen en in pinhole) is in fokus de laser beam mei in sirkulêre dwerstrochsneed útstjoerd troch de laser boarne yn in elliptyske beam mei in lytsere dwerstrochsneed. Dit ferspriedt de laser-enerzjy neffens in normale ferdieling, en soarget foar konsekwinte ferljochtingsintensiteit foar sellen oer it laserdeteksjegebiet en minimearret ynterferinsje fan strielljocht.
D'r binne trije haadtypen fan filters:
1: Langpassfilter (LPF) - lit allinich ljocht mei golflingten heger dan in spesifike wearde trochjaan.
2: Short-pass filter (SPF) - lit allinich ljocht mei golflingten ûnder in spesifike wearde trochjaan.
3: Bandpassfilter (BPF) - lit allinich ljocht yn in spesifyk golflingteberik trochjaan.
Ferskillende kombinaasjes fan filters kinne fluoreszinsjesinjalen op ferskate golflingten rjochtsje nei yndividuele fotomultiplikatorbuizen (PMT's). Bygelyks, filters foar it opspoaren fan griene fluoreszinsje (FITC) foar PMT binne LPF550 en BPF525. De filters dy't brûkt wurde om oranje-reade fluoreszinsje (PE) foar de PMT te detektearjen binne LPF600 en BPF575. De filters foar it opspoaren fan reade fluoreszinsje (CY5) foar de PMT binne LPF650 en BPF675.
Flowcytometry wurdt benammen brûkt foar sel sortearring. Mei de foarútgong fan kompjûtertechnology, de ûntwikkeling fan immunology en de útfining fan monoklonale antykodyttechnology, wurde har tapassingen yn biology, medisinen, apotheek en oare fjilden hieltyd wiidferspraat. Dizze applikaasjes omfetsje seldynamykanalyse, selapoptose, seltypen, tumordiagnoaze, analyse fan medisyneffektiviteit, ensfh.
Post tiid: Sep-21-2023
