(Flowcytometry, FCM) is in selanalysator dy't de fluoreszinsje-yntensiteit fan kleurde selmarkers mjit. It is in hightech-technology ûntwikkele op basis fan 'e analyze en sortearring fan yndividuele sellen. It kin de grutte, ynterne struktuer, DNA, RNA, aaiwiten, antigenen en oare fysike of gemyske eigenskippen fan sellen fluch mjitte en klassifisearje, en kin basearre wurde op it sammeljen fan dizze klassifikaasjes.
De streamcytometer bestiet benammen út de folgjende fiif ûnderdielen:
1 Stromingskeamer en fluidikasysteem
2 Laserljochtboarne en strielfoarmingssysteem
3 Optysk systeem
4 Elektroanika, opslach, werjefte en analysesysteem
5 Selsortearsysteem
Under harren is laser-eksitaasje yn 'e laserljochtboarne en it strielfoarmjende systeem de wichtichste mjitting fan fluoreszinsjesignalen yn flowcytometry. De yntensiteit fan it eksitaasjeljocht en de bleatstellingstiid binne relatearre oan 'e yntensiteit fan it fluoreszinsjesignaal. Laser is in koherinte ljochtboarne dy't iengolflingte, hege yntensiteit en hege stabiliteit kin leverje. It is de ideale eksitaasjeljochtboarne om oan dizze easken te foldwaan.
Der binne twa silindryske lenzen tusken de laserboarne en de streamkeamer. Dizze lenzen fokusje in laserstriel mei in sirkelfoarmige dwerstrochsneed dy't útstjoerd wurdt troch de laserboarne yn in elliptyske striel mei in lytsere dwerstrochsneed (22 μm × 66 μm). De laserenerzjy binnen dizze elliptyske striel wurdt ferdield neffens in normale ferdieling, wêrtroch in konsekwinte ferljochtingsintensiteit foar sellen dy't troch it laserdeteksjegebiet geane, garandearre wurdt. Oan 'e oare kant bestiet it optyske systeem út meardere sets lenzen, pinholes en filters, dy't rûchwei ferdield wurde kinne yn twa groepen: stroomopwaarts en stroomafwaarts fan 'e streamkeamer.
It optyske systeem foar de streamkeamer bestiet út in lens en in gaatje. De wichtichste funksje fan 'e lens en it gaatje (meastal twa lenzen en in gaatje) is om de laserstriel mei in sirkelfoarmige dwerstrochsneed dy't troch de laserboarne útstjoerd wurdt te fokusjen yn in elliptyske striel mei in lytsere dwerstrochsneed. Dit ferdielt de laserenerzjy neffens in normale ferdieling, wêrtroch in konsekwinte ferljochtingsintensiteit foar sellen oer it laserdeteksjegebiet garandearre wurdt en ynterferinsje fan stroailjocht minimalisearre wurdt.
Der binne trije haadtypen filters:
1: Lange trochlaatfilter (LPF) - lit allinnich ljocht mei golflingten heger as in spesifike wearde troch.
2: Koarte-passfilter (SPF) - lit allinnich ljocht mei golflingten ûnder in spesifike wearde troch.
3: Bandpassfilter (BPF) - lit allinnich ljocht yn in spesifyk golflingteberik troch.
Ferskillende kombinaasjes fan filters kinne fluoreszinsjesignalen op ferskillende golflingten nei yndividuele fotomultiplikatorbuizen (PMT's) rjochtsje. Bygelyks, filters foar it detektearjen fan griene fluoreszinsje (FITC) foar PMT binne LPF550 en BPF525. De filters dy't brûkt wurde om oranje-reade fluoreszinsje (PE) foar de PMT te detektearjen binne LPF600 en BPF575. De filters foar it detektearjen fan reade fluoreszinsje (CY5) foar de PMT binne LPF650 en BPF675.
Flowcytometry wurdt benammen brûkt foar selsortering. Mei de foarútgong fan kompjûtertechnology, de ûntwikkeling fan immunology en de útfining fan monoklonale antistoftechnology, wurde de tapassingen dêrfan yn biology, medisinen, farmaseutika en oare fjilden hieltyd wiidferspraat. Dizze tapassingen omfetsje seldynamika-analyze, selapoptose, seltypering, tumordiagnoaze, analyze fan medisyneffektiviteit, ensfh.
Pleatsingstiid: 21 septimber 2023
